@article{oai:toyama.repo.nii.ac.jp:00002626, author = {河野, 彩 and 小尾, 信子 and 吉井, 美穂 and 宮原, 龍郎 and 落合, 宏}, issue = {1}, journal = {富山大学看護学会誌}, month = {Sep}, note = {We attempted to establish the loop-mediated isothermal amplification method (LAMP) suitable for the detection of Serratia mercescens, a representative environmental and nosocomial infection-related bacteria, comparing with polymerase chain reaction method (PCR). LAMP-supporting soft wear was used to enable us to construct a primer set (PrS) consisting of 4 primers. The species-specificity of constructed PrS was confirmed by the trial LAMP in which DNA amplification was only positive in 8 trains of Serratia (S.) mercescens, but negative in other bacteria species (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus). The sensitivity assay using various numbers of S. mercescens showed that LAMP is superior at least 100-fold to PCR for the detection of DNA amplification. In addition, times required for its detection were shorter almost 90 min in LAMP than PCR. These data indicate that LAMP system suitable for the detection of S. mercescens is established for the first time in this study and its application on the clinical microbiology and infection control nursing might be useful from the aspects of simplicity, rapidity, sensitivity, specificity and time-consumption., 環境汚染菌の代表的存在であり,今後病院感染起炎菌としても重要と考えられているセラチア菌ではあるが,遺伝子迅速検出法の研究は少ない.このことから,Loop-mediated isothermal amplification(LAMP)法による迅速検出法の確立を試みた.プライマー設計支援ソフトにより,4種のプライマーを設計しLAMP法に応用したところ,DNA増幅は,セラチア菌8株に対してのみ認め,他4菌種(大腸菌,クレブシエラ,緑膿菌,黄色ブドウ球菌)では認められなかった. このことから,今回設計したプライマーの菌種特異性は高いことが確認された.セラチア菌液を種々希釈し,検出感度および検出時間を従来のPCR法を比較したところ,LAMP法が感度の点でほぼ100倍高く,かつ検出に要する時間もおよそ90分短いことが明らかにされた.これらの結果から,今回初めて開発されたセラチア菌検出用LAMP法キットは,検出特異性,感度,迅速性の点からも,臨床細菌学,感染看護の分野に有用であると考えられた., Article, 富山大学看護学会誌, 第7巻1号, 2007.9., page 13-22}, pages = {13--22}, title = {LAMP法によるセラチア菌の迅速検出に関する研究}, volume = {7}, year = {2007} }